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山羊生长激素释放多肽(GHRP)ELISA试剂盒,GHRP厂家
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山羊生长激素释放多肽(GHRP)ELISA试剂盒,GHRP厂家

发布时间:2015/9/2   更新时间:2018/6/25

型 号:

价 格: 2600

采购度:236

原产地:美洲

简单介绍:山羊生长激素释放多肽(GHRP)ELISA试剂盒加酶标抗体:于反应孔中,加入新鲜稀释的酶标第二抗体(抗抗体),37℃孵育30-60分钟,洗涤,*后一遍用DDW洗涤。

详细信息
   工作原理
 一、山羊生长激素释放多肽(GHRP)服务

      我们可以根据您的应用需要,比如在检测范围、种属以及灵敏度等方面有特殊要求,而量身定制检测试剂盒,有效控制检测试剂成本。并可提供免费代测。

二、检测概述

      ELISA(酶联接免疫吸附反应分析)是以免疫学反应为基础,将抗原、抗体的特异性反应与酶对底物的高效催化作用相结合起来的一种敏感性很高的实验技术。 由于抗原、抗体的反应在一种固相载体-聚苯乙烯微量滴定板的孔中进行,每加入一种试剂孵育后,可通过洗涤除去多余的游离反应物,从而保证试验结果的特异性与稳定性。

      实际应用中,通过不同的设计,具体的方法步骤可有多种。即:用于检测抗体的间接法、用于检测抗原的双抗体夹心法以及用于检测小分子抗原或半抗原的抗原竞争法等等。目前我们对客户提供比较常用的ELISA双抗体夹心法及ELISA间接法服务。

操作流程
三、山羊生长激素释放多肽(GHRP)ELISA试剂盒技术流程

双抗体夹心法(检测未知抗原)     间接法(检测未知抗体)

1、用缓冲液将抗体稀释至1-10ug/ml。在反应孔中加0.1ml4 过夜。次日,弃去孔内溶液,用洗涤缓冲液洗3次。

2、加样:加一定稀释的待检样品0.05ml于上述已包被之反应孔中,置37 孵育1小时。然后洗涤(同时做空白孔,阴性对照孔及阳性对照孔)

3、加酶标抗体:于各反应孔中,加入新鲜稀释的酶标抗体(经滴定后的稀释度)0.05ml37 孵育0.51小时,洗涤。

4、加底物液显色:于各反应孔中加入临时配制的TMB底物溶液0。1ml,37 1030分钟。

5、终止反应:于各反应孔中加入2M硫酸0.05ml

6、结果判定:可于白色背景上,直接用肉眼观察结果:反应孔内颜色越深,阳性程度越强,阴性反应为无色或极浅,依据所呈颜色的深浅,以“+”、“-”号表示。也可测OD值:在ELISA检测仪上,于450nm(若以ABTS显色,则410nm)处,以空白对照孔调零后测各孔OD值,若大于规定的阴性对照OD值的2。1倍,即为阳性。  1、用包被缓冲液将已知抗原稀释至1-10ug/ml 每孔加0。1ml4℃过夜。次日洗涤3次。

2、加样:加一定稀释的待检样品(未知抗体)0.05ml于上述已包被之反应孔中,37℃孵育1小时,洗涤。(同时做空白、阴性及阳性孔对照)

3、加酶标抗体:于反应孔中,加入新鲜稀释的酶标第二抗体(抗抗体)0.05ml37℃孵育30-60分钟,洗涤,*后一遍用DDW洗涤。

4、加底物液显色:于各反应孔中加入临时配制的TMB底物溶液0。1ml37 1030分钟。

5、终止反应:于各反应孔中加入2M硫酸0.05ml

6、结果判定:可于白色背景上,直接用肉眼观察结果:反应孔内颜色越深,阳性程度越强,阴性反应为无色或极浅,依据所呈颜色的深浅,以“+”、“-”号表示。也可测OD值:在ELISA检测仪上,于450nm(若以ABTS显色,则410nm)处,以空白对照孔调零后测各孔OD值,若大于规定的阴性对照OD值的2.1倍,即为阳性。

公司介绍
四、山羊生长激素释放多肽(GHRP)ELISA试剂盒客户须知

1、液体类标本(细胞培养上清、组织匀浆、血清、血浆、尿液、胸水、腹水、脑脊液等);

2、样本保存:请尽早检测,2-8℃保存一天;需更长时间须冷冻(-20℃或-70℃)保存。如需周期收集样本,请将样本及时分装标号后,置-20℃或-70℃保存;

3、请提前告诉我们:您样本的种属、样本数量、待测指标及其他特殊要求。

应用领域
五、
质量管理
ELISA 是一种敏感性高、特异性强、重复性好的实验诊断方法,由于其试剂稳定、易保存、操作简便、结果判断较客观等因素,以及既适宜于大规模筛查试验又可以用于少量标本的检测,既可以做定性试验也可以做定量分析等优点,已广泛应用于微生物学、寄生虫学、肿瘤学和细胞因子等领域。ELISA 的影响因素较多,加强质量管理才能充分发挥其方法学的优点。
分析前质控
●人员培训 实验是人操作的,因此检验人员需经过培训,熟练掌握本专业如下几方面的技术知识:
◎检验项目的基本原理 (ELISA 原理);
◎临床意义;
◎熟悉检测技巧,了解易出差错的环节及难点;
◎熟悉检测试剂性能(包括试剂盒组成,包被片段及其组成);
◎ 熟悉检测仪器的原理及性能;掌握数据处理的能力和质量控制知识。
◎某些特殊项目的检测如抗 HIV 等需经有关部门组织的专门培训班,考试合格后持证上岗。
分析前质控
◎ELISA 原理:1971 年Engvall 等人把免疫组化的EIA 技术应用于临床检验发展为ELISA 技术。
特点 :在固相表面组装免疫活性物质形成"免疫吸附剂"
酶标记免疫活性物质,进行信号放大;
有二步温育反应二次洗涤过程;
灵敏度特异性相对较高。
局限性:只能检测到 ng 水平
精密度差(批内CV15-20%);
线性范围窄(一个数量级);
存在"HD-HOOK"效应。
产品特点
六、
山羊生长激素释放多肽(GHRP)ELISA试剂盒所需要样本处理及要求:

1. 血清:室温血液自然凝固10-20分钟,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。

2. 血浆:应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右  (2000-3000转/分)去除颗粒。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应该再次离心。

3. 尿液:用无菌管收集,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。

4. 细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清   。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。

5. 组织标本:切割标本后,称取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。分装后一份待检测,其余冷冻备用。

6. 标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融.

7. 不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。

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